Serološki testi: vrste, uporaba

Laboratorijska diagnoza skoraj vseh nalezljivih bolezni temelji na odkrivanje krvi v bolnikovih protiteles, ki so pridobljeni z antigenom patogen, serološkimi metodami. Šli so v zdravniški praksi v poznem devetnajstem - v začetku dvajsetega stoletja.

Razvoj znanosti je pomagal opredeliti antigensko strukturo mikrobov in kemičnih formul njihovih toksinov. Možno je, da se ustvari, ne samo terapevtskega ampak tudi diagnostično serum. So dobimo z dajanjem oslabljena patogeni laboratorijskih živalih. Po nekaj dneh namakanjem krvi kuncev ali miši pripravljenih proizvodov, ki se uporabljajo za identifikacijo bakterij ali njihovih toksinov uporabo seroloških testov.

Zunanja manifestacija te reakcije je odvisno od pogojev njene formulacije in stanju antigenov v bolnikovi krvi. Če so mikrobi netopne delce, ki se usede, lizirali, imobiliziramo ali je vezan v serumu. Če so antigeni topna, se zdi pojav nevtralizacije ali obarjanjem.

aglutinacije (PA)

Serološki test aglutinacije je zelo specifična. Je enostaven za izvedbo in je povsem jasno, da se hitro ugotavljanje prisotnosti antigenov v serumu bolnikov. Uporablja se za nastavitev Vidal reakcijo (diagnozo tifus in paratifus) in WEIGL (tifus).

Temelji na specifično interakcijo med humanih protiteles (ali aglutinini) in mikrobnih celic (agglyutenogenami). Po njihovo interakcijo tvorjena delce, ki oborina. To je pozitiven znak. Za določanje reakcije se lahko uporabljajo žive ali mrtve mikrobnih agentov, glive, praživali, krvne celice in somatskih celic.

Kemijska reakcija poteka v dveh fazah:

1. Specifična protitelesa spojina (V) z antigeni (Ag).
2. Nespecifična - odlaganje konglomeratov AG-AT, tj nastanek Slijepljen.

Reakcija posredno aglutinacijo (TPHA)

Ta reakcija je bolj občutljiva od prejšnjega. Uporablja se za diagnozo bolezni, ki jih povzročajo bakterije, znotrajcelični zajedavci, povzročajo protozoji. To je tako specifična, da lahko zazna tudi zelo nizke koncentracije protiteles.

Za formulacije uporabi očistimo ovčjega rdečih krvnih celic in rdečih krvnih celic človeškega predhodno obdelane s protitelesi ali antigeni (odvisno od tega, kaj laboratorijske želi najti). V nekaterih primerih, človeške rdeče krvne celice, obdelane z imunoglobulini. Serološki odziv eritrocitov je veljavna, če le-teh padavin je prišlo na dnu cevi. Pozitivna reakcija lahko rečemo, ko so celice razporejene v obliki obrnjenega dežnika, ki obsega celotno dno. Negativni Reakcijo mrežo, ko rdeče krvničke se usede v obliki kolone ali gumbov v sredini dna.

obarjanje Reakcijsko (RP)

Serološke reakcije te vrste služijo za zelo majhne delce antigene. To se lahko, na primer proteini (ali njihovi deli) spojine s proteini z lipidi ali ogljikovimi hidrati, del bakterij in njihovih toksinov.

Serumi za reakcijo se pridobi z umetno okužbe živali, običajno na kuncih. Pri tej metodi, lahko dobite popolnoma nobene obarjanje serum. Uprizoritev serološki obarjanja podoben mehanizem delovanja na aglutinacije. Protitelesa, ki jih vsebuje seruma vežejo na antigene v koloidni raztopini , da se tvori velike beljakovinske molekule, ki se odlagajo na dnu cevi ali na substrat (gel). Ta metoda se šteje, da je zelo specifičen in lahko zazna tudi majhne količine snovi.

Uporabljajo za diagnosticiranje kugo, tularemijo, antraks, meningitis in druge bolezni. vključeni tudi v forenzično preiskavo.

Preskus gel padavine

Serološki testi se lahko izvede ne le v tekočem mediju, ki pa v agaroznem gelu. To se imenuje razpršeno metoda padavine. Z njim preuči sestavo kompleksnih antigenskih zmesi. Ta metoda temelji na kemotakso antigenov protiteles in obratno. Gel se premikajo drug proti drugemu pri različnih hitrostih in sejo da se tvori padavin linij. Vsaka vrstica - ena skupina K-AT.

Nevtralizacija eksotoksin antitoksin (RN)

Antitoxic serumu lahko nevtralizirajo eksotoksin ki mikroorganizmi proizvajajo. Na podlagi teh podatkov in serološke preiskave. Mikrobiologija uporablja to metodo titracije seruma, toksinov in toksoidom ter njihovo terapevtsko aktivnost. Moč nevtralizacije toksina opredeljujejo običajnih enot - AE.

Poleg tega se lahko zaradi te reakcije določitev vrste ali vrste, ki pripadajo eksotoksin. Uporablja se pri diagnozi tetanusu, davici, botulizem. Študija se lahko izvede "na steklo", in v gelu.

liza Reakcijsko (RL)

Imunski seruma, ki vstopi v telo bolnika, ima poleg svoje glavne funkcije pasivne imunosti, celo in litičnih lastnosti. To je sposobna raztopiti mikrobnih agentov, celičnimi in tuje elementi virus vstopajo v telo bolnika. Odvisno od specifičnosti protiteles vključene v serumu izoliramo bactericidin, cytolysins, spirohetoliziny, hemolysins in drugo.

Ta specifična protitelesa se imenujejo "dopolnilo". Treba je najti v skoraj vseh telesnih tekočin, ima kompleksno strukturo beljakovin in je zelo občutljiva na povečanje temperature, stresali, kislin in neposredni sončni svetlobi. Toda v suhem stanju je, da ohranijo svoje litičen lastnosti do šest mesecev.

Obstaja nekaj vrst serološke preiskave te vrste:

- bakteriolize;

- hemoliza.

Bakteriolize se izvaja na podlagi bolnikove krvi serum in posebne imunski serum z živimi mikrobi. Če je, potem je raziskovalec vidi lizo bakterij, in odgovor se šteje, da je prisoten v krvi zadostno število pozitivnih dopolnilo.

Drugi odziv krvnega serološki je, da suspenzijo eritrocitov zdravljenih bolnikov hemolysins vsebuje serum, ki se aktivirajo šele v prisotnosti določenega kompliment. Če obstaja, potem laboratorij gledal razpad rdečih krvnih celic. Ta reakcija se pogosto uporablja v sodobni medicini za določitev titer komplementa (tj njena najmanjša količina izzove lizo eritrocitov) v krvnem serumu in za proizvodnjo komplementnega vezivnem testu. Bilo je na ta način poteka serološki odziv na sifilis - Wasserman.

vezanja komplementa (RSK)

Ta reakcija se uporablja za odkrivanje protiteles v serumu pacientov z povzročitelja okužbe, kot tudi za identifikacijo avtorju njegovo antigensko strukturo.

Do te točke smo opisali preprost seroloških testov. RAC šteje težko reakcijo, saj interakcijo ne dva, temveč tri elemente: protitelo, antigen in dopolnjujejo. Njegovo bistvo je v tem, da pride do interakcije med protitelesom in antigenom samo v prisotnosti proteinov kompliment, ki se adsorbirajo na površini tvori kompleksne K-AT.

Sami antigeni po dodatku dopolnilo, pod pogojem, da bistvenih sprememb, ki kažejo na kakovost reakcije. To je lahko razpada, hemoliza, imobilizacija, baktericidno in bakteriostatično učinek.

Reakcijsko sama pojavlja v dveh fazah:

1. Tvorba protitelesa proti antigenom, ki ni vidno opazna raziskovalec.
2. Spreminjanje antigena v okviru delovanja komplementa. Ta faza se običajno lahko zasledimo s prostim očesom. Če je vizualni odgovor ni viden, nato pa dodatno sistema kazalnikov, ki omogoča zaznavanje sprememb.

indikator sistem

Ta reakcija temelji na vezavi dopolnilo. Epruvete ur po nastavitvi RSK dodamo prečiščeno ovčjih eritrocitov in serumskih hemolitična ne vsebuje komplement. Če je cev levo nevezan komplement, bo pridružila kompleksne N-at tvorjen med ovce krvnih celic in hemolizin, in povzroči njihovo raztapljanje. To bi pomenilo, da je DGC negativen. Če eritrocitov ostala nepoškodovana, potem zato je reakcija pozitivna.

hemaglutinacijo (RHA)

Obstajata dve bistveno različni hemaglutinacijo. Eden od njih - serološka se uporablja za določanje krvnih skupin. V tem primeru eritrociti interakcijo s protitelesi.

In druga reakcija ni povezana s serološkimi, saj rdečih krvnih celic reagirajo z hemaglutinina, ki jih povzročajo virusi. Ker vsak Vzbujevalnik deluje samo na določenih eritrocitov (piščanec, ovca, opica), lahko sklepamo, ta reakcija ozko specifična.

Jasen pozitiven ali negativen odgovor, je mogoče za lokacijo krvnih celic na dnu cevi. Če ugotovimo, spominja na obrnjeni dežnik, nato pa želeno virus prisoten v bolnikovi krvi. In če je vse rdeče krvne celice so oblikovane kot pred stolpcev kovancev, ne obstajajo neznani patogeni.

Reakcija inhibicije hemaglutinacije (HAI)

Ta zelo specifične reakcije, ki omogoča določiti obliko, tip virusa ali prisotnosti specifičnih protiteles v serumu bolnikovi krvi.

Njegovo bistvo je v tem, da so protitelesa dodali v cevko, ki vsebuje preskusno snov, preprečuje odlaganje antigenov na eritrocitih, s čimer se zaustavi hemaglutinacije. Gre za kvalitativno indikacijo prisotnosti specifičnih antigenov v krvi do določenega želenega virusa.

Reakcija imunofluorescenčni (RIF)

Reakcijsko temelji na zmožnost identifikacije komplekse z AT-AH fluorescenčno mikroskopijo po zdravljenju flyuorohromnymi barvil. Ta metoda je enostavna za uporabo, ne zahteva izolacijo čiste kulture in traja nekaj časa. To je nujno za hitro diagnosticiranje nalezljivih bolezni.

V praksi se ti serološki testi razdeljeni v dve kategoriji: neposredne in posredne.

Neposredno RIF proizvajajo antigen, ki predhodno obdelanih fluorescentno seruma. In Posredno je, da je zdravilo najprej obdelamo s konvencionalno diagnosticum vsebuje protitelesa proti želeni antigen, in nato ponovno uporabljene fluorescentno sirotke, ki je specifičen za proteinov kompleksa K-AT in mikrobnih celic postanejo vidna z mikroskopom.